Karzinommetastase, Karzinom Metastasen.

Karzinommetastase, Karzinom Metastasen.

Karzinommetastase, Karzinom Metastasen.

  • © 2001 Die amerikanische Gesellschaft für Ernährungswissenschaften
  1. Yoshiyuki Kimura 1 und
  2. Hiromichi Okuda
  1. Zweite Abteilung für Medizinische Biochemie, Medizinische Fakultät, Ehime-Universität, Shigenobu-cho, Onsen-gun, Ehime 791-0295, Japan
  1. ↵ 1 Eine wen Korrespondenz zu richten. E-mail: yokim@m.ehime-u.ac.jp.

abstrakt

MATERIALEN UND METHODEN

Allgemeine Experimentelle Elle Elle Verfahren.

Schmelzpunkte, mit Bestimmt Einems Yamato MO-21 Kapillar-vorrichtung verwendet (Yamato Wissenschaft Tokyo, Japan), Angebote Angebote sind nicht korrigiert. IR- und UV-Spektren gerechnet gerechnet wurden Einems Shimadzu IR-400-Spektrometer gemessen unter verwendung von (Shimadzu, Kyoto, Japan) und Einems JASCO ORD / UV-5-Spektrometer (JASCO, Tokyo, Japan) Sind. Das 1 H-Kernresonanzspektroskopie (NMR) (4899,83 Hz) Spektrum Würde in DMSO-d aufgezeichnet6 und Lösungsmittel plus D2 O Eine Varian Unity Inova 500 Spektrometer (TOSO, Tokyo, Japan). Säulenchromatographie Würde unter verwendung von Kieselgel 60 (70-230 mesh, ASTM, Merck KGaA, Darmstadt, Deutschland) und Polyamid (ICN Pharmaceuticals, Costa Mesa, CA).

Materialien.

Zellen.

Die stark metastatischen, arzneimittelresistenten Maus LLC-Zellen gerechnet gerechnet wurden von Riken Gene Bank (Tukuba, Japan) und Gehalten in DMEM, ergänzt mit 100 ml / l FBS, Penicillin (1 · 10 5 U / L), Streptomycin (100 mg / l erhalten) und Amphotericin B (0,25 mg / l). HUVEC und Rinder-Aorta-Endothelzellen (BAEC) von Clonetics gerechnet gerechnet wurden (San Diego, CA) erworben und Sannkou Junyaku (Tokyo, Japan) Verbunden Sind; sterben HUVEC und BAEC- gerechnet gerechnet wurden auf Kollagen (Typ I) ausgesät -beschichteten 24- oder 6-Lochplatten und in Clonetics Endothel-Basalmedium ergänzt Wachstumsfaktor (EGM) oder CS-C Medien Gehalten.

Tiere.

Weibliche C57BL / 6-Stamm-Mäuse (5 Wochen alt) gerechnet gerechnet wurden von Clea Japan (Osaka, Japan) erhalten. Sie gerechnet gerechnet wurden für 1 Woche in einem Raum untergebracht bei 25 ± 1 ° C und 60% Relativer luftfeuchtigkeit Gehalten und den Freien zugang zu nicht-gereinigter Ernährung [(pro 100 g Diät) gegeben: Wasser 8 g, roh Kohlenhydrate 51,3 g , Rohprotein 24,6 g, Rohen Lipid 5,6 g, Rohfaser 3,1 g, Mineralmischung 6,4 g und Vitaminmischung 1 g; Oriental Yeast, Osaka, Japan] und Wasser. Das Zimmer Wurde für 12 h / d beleuchtet bei 0700 h Beginnen. Die Tiere nach den gerechnet gerechnet wurden ethischen Richtlinien der Animal Center, School of Medicine, Ehime Universität Behandelt.

Messung des Tumorwachstums und der Metastasierung Longe in LLC-tragenden Mausen.

Messung der DNA-Synthese in Zellen, LLC.

Messung der Apoptose und der Zellzyklus in LLC-Zellen.

Messung der DNA-Synthese in BAEC- und HUVEC.

LLC Zelladhäsion ein HUVEC.

Die Bindung von VEGF 125 Eine HUVEC I-Westerwaldkreis.png.

Statistische Analyse.

ergebnisse

Anti-Tumor und antimetastatic aktivitäten.

Wirkungen von Resveratrol auf Anzahl der Kolonien von Lewis-Lungenkarzinom (LLC) -Zellen in der Lunge auf 22 d in LLC-tragenden Mausen metastasierenden sterben. Werte Sind Mittelwerte ± SEM. n = 7. Diejenigen, sterben nicht EINEN Kurz teilen, Sind merkbar Unterschiedlich, P lt; 0,05.

Körpergewicht, Milz und Thymus Gewicht, und sterben Anzahl von Milzlymphozyten, CD4 +. CD8 + und NK1.1 + T-Zellen.

Wirkungen von Resveratrol auf sterben Gewichte von Körper, Milz Thymus und in Lewis-Lungenkarzinom (LLC) -haltiger Mäuse; gt; 1

DNA-Synthese, Apoptose und der Zellzyklus in LLC-Zellen (in vitro).

WIRKUNG von Resveratrol auf 3 H-Thymidin-Einbau in DNA von Lewis-Lungenkarzinom (LLC) -Zellen in Mausen. Werte Sind Mittelwerte ± SEM. n = 4. Diejenigen, sterben nicht EINEN Kurz teilen, Sind merkbar Unterschiedlich, P lt; 0,05.

WIRKUNG von Resveratrol auf Apoptose, G sterben0 /G1. S und G2 / M-Phasen des Zellzyklus in Lewis-Lungenkarzinomzellen; gt; 1

Tumor- und Matrigel-induzierte Angiogenese und (in vivo und in vitro).

WIRKUNG von Resveratrol auf Matrigel-induzierte Kapillar-ähnlichen Netzwerkbildung von Menschlichen Nabelvenen-Endothelzellen (HUVEC). Werte Sind Mittelwerte ± SEM. n = 4. Diejenigen, sterben nicht EINEN Kurz teilen, Sind merkbar Unterschiedlich, P lt; 0,05.

DNA-Synthese in BAEC- und HUVEC (in vitro).

Resveratrol hemmte merkbar DNA-Synthese von BAEC- bei Konzentrationen von 50-500 sterben μ mol / L, Aber nicht auf 5 und 10 μ mol / L (Daten nicht gezeigt). Die Hemmungsverhältnisse Betrügen 45,5% bei 50 μ mol / l, 81,5% bei 100 μ mol / L und 68,4% bei 500 μ mol / l, MIT Jeweils Einems IC-50 von 54 μ mol / L. Ferner IST ein Resveratrol hemmte sterben DNA-Synthese von HUVEC von 100 μ mol / l; Seine Hemmung Verhaltnis Betrug 69,3%, bei Aber nicht Konzentrationen von 5, 10 und 50 μ mol / l; IC sterben50 Krieg 89 μ mol / L (Daten nicht gezeigt).

Die einhaltung von LLC-Zellen und Bindung von 125 I-VEGF ein HUVEC (in vitro).

Wenn Zellen LLC gerechnet gerechnet wurden auf HUVEC-Monoschicht ausgesät sterben Wurde einhaltung von LLC-Zellen Eine HUVEC von 10,4 ± 2,8 bis 50,8 ± 6,4% der Gesamten Zellen erhöht sterben. Resveratrol hatte keine wirkung auf das anhaften von Zellen ein HUVEC LLC (Daten nicht gezeigt). Resveratrol hemmte merkbar Bindung von VEGF ein HUVEC bei 10-100 sterben μ mol / L KONZENTRATION (Feige. 6 ).

Wirkungen von Resveratrol auf Bindung von 125 I-vaskulären endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF) Eine humane Nabelvenen-Endothelzellen (HUVEC) sterben. Werte Sind Mittelwerte ± SEM. n = 4. Diejenigen, sterben nicht EINEN Kurz teilen, Sind merkbar Unterschiedlich, P lt; 0,05.

DISKUSSION

Tumor Zell-Interaktionen mit Blutplättchen, Endothelzellen und der subendothelialen Matrix für Tumoren Essentielle Zwischenschritte zur Fertigstellung der metastasierten Kaskade angesehen (14, 26. 27. 28). Um sterben antimetastatische aktivität von Resveratrol zu testen, sterben wir untersuchten WIRKUNG von Resveratrol auf Wechselwirkungen von LLC-Zellen Mit HUVEC sterben. Resveratrol hatte keine wirkung auf Anhaftung von Zellen, LLC HUVEC zu Monolage (Daten nicht gezeigt) sterben, Krieg darauf hinweist, ZVE antimetastatische aktivitäten von Resveratrol die sind nicht auf sterben Hemmung der Anhaftung von LLC-Zellen ein HUVEC.

Fußnoten

↵ 2 Verwendete Abkürzungen: BAEC-, Zellrinderaorta endothelialen; BCECF, 3′-O -Acetyl-2 ‘, 7’-bis (carbocyethyl) -4 oder 5-carboxylfluorescein; DMEM, Modifizierte Dulbecco Adler-Medium; EBM, Endothel-Basalmedium; EGM, Endothel-Basalmedium ergänzt Wachstumsfaktor; FBS, fötales Rinderserum; FITC, Fluorescein-Isothiocyanat; HUVEC, humane Nabelschnurvenen-Endothelzellen; IC50. 50% hemmende KONZENTRATION; LLC, Lewis-Lungenkarzinom; NK, Natürliche Killer-; NMR, kernmagnetische Resonanz; PE, Phycoerythrin; TCA, Trichloressigsäure; VEGF, Vascular Endothelial Growth Factor.

  • Manuskriptdaten Eingereicht: 7. Dezember 2000.
  • Erste Überprüfung abgeschlossen: 12. Januar 2001.
  • Revision Angenommen: 12. März 2001.

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